E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomycete Phytophthora infestaner (Mont) de Bary orsakar senblod, en farlig sjukdom av potatis och tomater. En av de viktigaste källorna till primär ympning P. infestans är tjockväggiga vilande reproduktiva strukturer - oosporer.
Hybrida oosporer bildade som ett resultat av att korsa genetiskt olika föräldrastammar bidrar till en ökning av genotypisk mångfald i befolkningen, vilket resulterar i att processen för anpassning av stammar till nya sorter och applicerade fungicider accelereras.
Oosporbildning P. infestans i fältet noterades i många länder i världen: Ryssland (Smirnov et al., 1999), Norge (Hermansen et al., 2002), Sverige (Strömberg et al., 2001), Nederländerna (Kessel et al., 2002) och andra regioner. Oosporer kan bestå i jorden i ett livskraftigt tillstånd i mer än 2 år (Bødker et al., 2006) och orsaka växtinfektion efter övervintring (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Tidigare visades att bladen av växter av olika nivåer av potatisbusken har skillnader i motståndskraft mot senblod; det ökar från de nedre bladen till de övre. Denna tendens beror inte på bladålder, växtålder eller potatisort (Vesper et al., 2003). Samtidigt misslyckades vi med att hitta data om skillnader i intensiteten av oosporbildning i bladen av olika nivåer av potatisbusken i litteraturen. Men om det finns sådana skillnader bör de beaktas när man tar bladprover för analys av oosporbildning och när man tolkar de resultat som erhållits av andra författare. Syftet med detta arbete var att studera bildandet av oosporer i de lösgjorda bladen i olika lager av en potatisväxt, placerade under samma förhållanden i fuktiga kammare.
Material och metoder
Vi använde 5 isolat P. infestans olika typer av parning isolerade från berörda prover från regionerna Moskva, Ryazan och Leningrad. Av dessa valdes 3 par stammar av olika parningstyper, vilket gav rikliga oosporer när de testades i agar havregryn.
För testning använde vi virusfria potatisväxter av följande sorter odlade i ett växthus (i ett torvunderlag): tidigt Sandrin, Zorachka, Uladar, Osiris, mitten av tidigt Ilyinsky, mitten av säsongen Yanka.
Enkla blad från olika nivåer av potatisväxten valdes för analys. Tre blad valdes från den nedre nivån (4 nedre sammansatta blad), tre från toppen (3-4 sammansatta blad på toppen) och tre löv från mitten av busken. Enkla blad vägdes, fotograferades på koordinatpapper (för att beräkna volym och area) och placerades sedan upp och ner på ytan av sterilt vatten, hälldes 25 ml i petriskålar. Sedan infekterades varje blad med en droppe av en blandad suspension av zoosporangia-isolat Al och A1 av parningstypen. För tre löv som samlats in från varje nivå användes ett inokulat med tre olika par isolat. Ett blad infekterades med en ympblandning av ett par isolat.
För att bereda en suspension av zoosporangia odlades isolat av olika parningstyper på agar havremedium under 7 dagar, varefter zoosporangia tvättades av med sterilt destillerat vatten. Koncentrationen av inokulatet var 5-7 zoosporer i mikroskopets synfält vid 80x förstoring. Varje blad förorenades med en droppe av en blandad suspension av zoosporangia-isolat Al och A1 parningstyp.
I alla experiment användes 3 potatisblad per variant. Efter inkubering under 20 dagar vid 18 ° C homogeniserades varje blad i en mortel med 2 ml destillerat vatten. Från den resulterande suspensionen togs 3 prover, från vilka preparat för mikroskopi bereddes.
I varje variant undersöktes 180 synfält, varefter antalet oosporer beräknades om per 1 mm2 arkytan. Räkningsresultaten för varje variant beräknades i genomsnitt.
För att beräkna konfidensintervallet (μ) för en signifikansnivå på 0,05 användes följande formel
där s är standardavvikelsen, n är antalet mätningar, t är t-testkonstanten för en signifikansnivå på 0,05. Alla beräkningar utfördes i Excel (Microsoft Office-paketet).
resultat och diskussion
Inymning av löv som samlats från olika lager av en potatisbuske och placerats under samma förhållanden i fuktiga kammare avslöjade skillnader i intensiteten av oosporbildning. I alla studerade sorter bildades maximalt antal oosporer vid ympning av löv som samlats från buskens nedre och mellersta nivå. Inga signifikanta skillnader hittades i bildandet av oosporer i de nedre och mellersta bladen.
Det minsta antalet oosporer bildades i övre skiktets löv (fig. 1).
I bladen på de nedre och mellersta nivåerna bildades det maximala antalet oosporer i sorterna Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar och Osiris. De bildades något mindre intensivt i bladen av Yanka-sorten. Det maximala antalet oosporer i övre nivåens löv observerades i Uladar-sortens löv, följt av Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin i fallande ordning; emellertid var inte alla skillnader statistiskt signifikanta.
Figur: 1. Bildning av oosporer i bladen av olika lager av potatisbusken. De nedre är bladen på de tre nedre nivåerna av busken, de övre är 3-4 komplexa löv från toppen av växten, de mellersta är från mitten av busken.
Felstaplar visar konfidensintervallet för en signifikansnivå på 0,05.
På fältet bidrar mikroklimatiska förhållanden också till bildandet av oosporer i buskens nedre och mellersta blad: högre luftfuktighet, minskad solisolering och dagliga temperaturvariationer (Harrison, 1992). Toppsprutning resulterar i mindre bekämpningsmedel i buskens botten och mitt. För att minska bildningen av oosporer bör tekniker användas som möjliggör framgångsrik leverering av svampdödande medel till buskens nedre och mellersta delar. Goda resultat kan uppnås genom att använda turbulenta luftsprutor och systemiska fungicider som kan spridas till obehandlade delar av busken.
Detta arbete stöddes av Russian Science Foundation (projekt nr 14-50-00029).
Artikeln publicerades i tidskriften "Potato Protection" (nr 2, 2015)